Descrição de uma câmara simples para cultivo in vitro de embriões.

Descrição de uma câmara simples para cultivo “in vitro” de embriões

Matheus, M.; Approbato, M. S.; Sala, M. A. Reprodução, 1:29-32, 1986.

Introdução

O objetivo do presente trabalho foi o de desenvolver e testar uma câmara para cultivo “in vitro” de embriões de coelha e adquirir o embasamento indispensável para o cultivo “in vitro” de embriões humanos.

Descrição da Câmara

Approbato idealizou uma incubadora de acrílico de 25,5 cm x 12,0 cm x 7,5 cm, no interior da qual pode-se dispor até 10 frascos de cultivo (Figura 1) utilizando-se uma pinça de aço flexível (4) feita especialmente para este fim. Acima dos frascos existem perfurações de 3 cm de diâmetro que são fechados com rolhas esterilizadas de látex (2). Através destas rolhas podem se efetuar trocas de meio de cultivo ou testar o mesmo, mediante o uso de agulhas 18x90 BD (1). Nas paredes laterais existem comunicações que permitem a passagem de uma mistura gasosa contida em um torpedo (A). No presente estudo utilizou-se blastocistos de coelha e mistura gasosa com 95% de ar e 5% de CO2. A mistura gasosa antes de penetrar na câmara de cultivo é filtrada (B), umidificada aquecida a 37º C por borbulhamento em Erlenmeyer (C) contendo água tri-destilada e desionizada. O Frasco (5) permite a confirmação da passagem do gás na câmara de cultivo. A câmara é mantida aquecida a 37º C no interior de uma estufa que se encontra em quarto asséptico.

Resultados (Sumário)

Tabela 1 Desenvolvimento dos blastocistos em função do tempo de cultivo. USP-FMRP, 1986.
Tempo de cultivo	Blastocistos cultiv.	Blastocistos desenvolv.	%
6h	17	17	100,0
9h	23	22	95,6
12h	20	20	100,0
Figura 1 – Câmara de cultivo. Approbato, 1986.

Conclusões (sumário)

A câmara de cultivo idealizada se prestou bem para o cultivo de blastocistos de 6 dias de coelha, fornecendo 98,3% de desenvolvimento, considerando-se globalmente os cultivos de 6, 9 e 12 h no meio BSM II.